我公司由国内外一大批教授领衔的诺优生物是一家致力于多肽类试剂和抗体服务的集研究开发生产于一体的高新科技企业,汇集了五位博士组成科研团队以及20多位有着多年合成经验的实验员,立志研发高品质的高难度的高成功率的生物试剂产品,他们有着同样的梦想,充满激情。
若是您有多肽合成这方面的需求,欢迎随时和我公司联系,我公司在多肽的高难度修饰上面有着很深的研究,目前可做的高难度修饰有胆固醇修饰,PNA多肽,小分子修饰肽,订书肽,多巴修饰,Nota修饰,三对二硫键定位修饰等等,以及普通的多肽修饰例如:环肽(首尾酰胺环,二硫键成环等),磷酸化修饰肽(Ser,Thr,Tyr),脂肪酸修饰肽(Pal,Myr),生物素(Biotin)标记肽,同位素标记(N15,C13),荧光标记肽(FAM,FITC,Rodamine B, TAMRA等),复合抗原肽(MAP4,MAP8,MAP16分支),PEG修饰,甲基化修饰,侧链修饰,蛋白偶联(KLH,BSA,OVA),荧光淬灭基团标记(EDANS,DABCYL),以及含有D型氨基酸及各种氨基酸衍生物类型的多肽等等。在此我公司特向所有客户郑重承诺:您们的要求就是我们的追求,您们的鼓励就是我们的动力,您们的想法就是我们的做法,您们的表情就是我们的心情。
1. 非放射性核素标记
目前在非放射性核素标记中,使用广泛的仍然是C13,H2,因为其使用安全,放射性小。现在有比较完全的非放射性标记的氨基酸,可以按照正常的多肽合成方法将标记好的氨基酸直接连接到多肽上。
2. 荧光标记
荧光标记由于没有放射性,实验操作简单。因此,目前在生物学研究中荧光标记应用非常广泛,荧光标记方法与荧光试剂的结构有关系,对于有游离羧基的采用的方法与接肽反应相同,也采用HBTU/HOBt/DIEA方法连接。 在N端标记FITC的多肽需经历环化作用来形成荧光素,通常会伴有最后一个氨基酸的去除,但当有一个间隔器如氨基己酸,或者是通过非酸性环境将目的肽从树脂上切下来时,这种情况可避免。
3. 生物素标记
生物素-亲合素系统 (biotin-avidin system,BAS),是70年代后期应用于免疫学,并得到迅速发展的一种新型生物反应放大系统。由于它具有生物素与亲合素之间高度亲和力及多级放大效应,并与荧光素、酶、同位素等免疫标记技术有机地结合,使各种示踪免疫分析的特异性和灵敏度进一步提高。主要有用于标记多肽氨基的生物素N-羟基丁二酰亚胺酯(BNHS)和生物素对硝基酚酯(pBNP),其中以BNHS最常用,当然,也可以直接使用生物素也可以标记,因为其结构上有个游离的羧基,采用HBTU/HOBt/DIEA方法缩合,由于生物素的溶解度低,使用DMSO/DMF的混合溶剂增加溶解度。
4. 磷酸肽合成
磷酸肽在生命过程中发挥重要作用,磷酸化的位置在多肽上的Ser,Thr,Tyr。目前磷酸肽合成一般都采用磷酸化氨基酸,目前使用的都是单苄基磷酸化氨基酸。磷酸化氨基酸的连接一般采用HBTU/HOBt/DIEA方法,但是目前采用该方法合成磷酸化也有缺点,特别是在合成多磷酸化多肽或长肽的时候,连接效率低,最后产品纯度很低,对于这种磷酸化多肽,我们考虑采用后磷酸化方法,其合成过程就是在多肽合成结束后,选择性脱去要标记的氨基酸的侧链保护基,对于Tyr,Thr可以直接使用侧链不保护的氨基酸进行反应,而Ser可以采用Fmoc-Ser(trt),在1% TFA/DCM条件下可以定量的脱除。后磷酸化,采用双苄基亚磷酰胺,四氮唑生成亚磷酰胺四唑活性中间体,连接到羟基上,随后在过氧酸下氧化生成磷酰基,完全反应。