针对不同应用的抗体来设计不同的抗原是抗体开发的关键第一步。抗原，是指能够刺激机体产生（特异性）免疫应答，并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体外结合，发生免疫效应（特异性反应）的物质。抗原的基本特性有两种：
一是诱导免疫应答的能力，也就是免疫原性。
二是与免疫应答的产物发生反应，也就是抗原性。

通常用于制备抗体有：蛋白与多肽，其中多肽因其分子量较小，不具免疫原性，是一种半抗原，需要与大分子蛋白质载体结合后形成具有免疫原性的完全抗原。 具体通过基因合成、亚克隆和表达纯化获得蛋白制备抗体，还是通过设计、合成多肽并偶联载体蛋白作为抗原制备抗体，需要根据抗体应用于什么实验，以及您所能获得的材料、信息来决定。

例如,CO-IP、FACS、NeutralizingBlocking以及Elisa法检测天然蛋白等实验，实验过程中蛋白处于天然状态，使用的抗体识别的一般是蛋白的构象表位和线性表位，采用蛋白作为抗原较为理想。而如果氨基酸序列已知，但是由于基因克隆或表达等原因得不到 抗原蛋白，或者仅需要得到针对抗原蛋白某几个特定表位，获特定修饰性位点的抗体，就可以采用多肽合成的方式得到抗原。 拥有国内领先的抗原制备技术和先进的仪器设备，可为客户提供：（1）原核蛋白表达与纯化服务，通过全基因合成和亚克隆，构建表达载体，利用不同的表达菌株与纯化介质，最终获得具有一定纯度和浓度的高质量蛋白抗原。
（2）多肽合成和载体蛋白（KLH/BSA/OVA）偶联服务。

 ==================================

 原核蛋白表达

我公司已成功构建完整的各种蛋白表达技术平台：包括原核蛋白表达与纯化、酵母蛋白表达与纯化、昆虫细胞蛋白表达与纯化、哺乳动物细胞蛋白表达与纯化。根据客户的需求，我们提供从基因合成，载体构建，基因表达，蛋白纯化、检测等一站式服务。为了保证蛋白纯化的质量，诺优生物建立了严格的产品质控体系及一整套完善的客户服务流程、保密制度以确保为客户提供优质的产品及一流的服务。 我们的蛋白质团队在优化基因密码子、表达载体的设计和构建、融合对象和标签的选取、特定蛋白纯化系统的选择、蛋白生产工艺的优化等方面，拥有极其丰富的经验。可以满足客户个性化的需求。

原核蛋白表达与纯化

原核蛋白表达是将植物、动物、微生物等的目的基因插入合适载体后导入大肠杆菌表达出大量目的蛋白。这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于 表达重组蛋白有以下优点：易于生长和控制；易于培养，实验耗费少；可选择多种大肠杆菌菌株及与之匹配的具各种特性的质粒。原核蛋白表达系统是迄今为止最为成熟可靠的蛋白表达系统。 原核蛋白表达技术服务按步骤收费，您可以选择从以下任意一步开始提供服务或仅选择其中的单独一步，详细价格请垂询。

如需前期分子生物学技术服务请参考相关内容。
服务特色：
1、一站式解决方案，从基因合成到蛋白表达纯化，完成您的实验设计。
2、技术成熟稳定/方法手段齐全。
3、服务周期短。
原核蛋白表达（E. coli ）技术服务内容：
1、基因合成，
提供客户：合成的基因及测序序列。
时间： 1~2
2、载体构建（表达载体的设计和构建、融合对象和标签的选取。）
扩增并抽提构建好的表达质粒。将表达质粒转化到高效的E. coli表达菌株中。至少挑选数个阳性克隆于LB培养基中扩增并诱导表达目标蛋白。电泳检测，菌株中目标蛋白的表达情况，并挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。
提供客户：重组质粒的表达菌株及表达检测报告。
时间： 1~2周
3、摇瓶培养重组细菌，诱导表达目标蛋白。
通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
利用蛋白酶去除不需要的纯化标签（Tag），再纯化获得所需的目标蛋白（可选，构建表达载体时需加入合适的蛋白酶切位点）。
诺优生物科技有限公司会通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
通过Western-blot验证目标蛋白正确性。 提供客户：纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达95%以上。
时间： 2~3周
4、大规模蛋白制备。
蛋白生产工艺的优化
提供客户：合格的目标蛋白及服务报告。 
时间：协商
5、蛋白复性服务。
利用不同复性缓冲液的体系，对目标蛋白进行小量复性试验提供复性后样品供客户检测。可根据客户要求，按照其中一种样品的复性条件制备小量的复性蛋白。我公司可提供具体的复性缓冲液配方及复性工艺。
其他：除菌，冻干等进一步加工。
详细检测目标蛋白的质量。
提供客户：加工后的最终产品及相关实验和检测报告。 

=============================================================

酵母蛋白表达

我公司已成功构建完整的各种蛋白表达技术平台：包括原核蛋白表达与纯化、酵母蛋白表达与纯化、昆虫细胞蛋白表达与纯化、哺乳动物细胞蛋白表达与纯化。根据客户的需求，我们提供从基因合成，载体构建，基因表达，蛋白纯化、检测等一站式服务。为了保证蛋白纯化的质量，诺优生物建立了严格的产品质控体系及一整套完善的客户服务流程、保密制度以确保为客户提供优质的产品及一流的服务。 我们的蛋白质团队在优化基因密码子、表达载体的设计和构建、融合对象和标签的选取、特定蛋白纯化系统的选择、蛋白生产工艺的优化等方面，拥有极其丰富的经验。可以满足客户个性化的需求。

酵母蛋白表达

重组蛋白表达与纯化技术服务（P. Pichia表达系统）

目前成熟的表达体系包括：原核表达系统(大肠杆菌 E. coli表达系统)、酵母表达系统(P. Pichia表达建立了严格的产品质控体系及一整套完善的客户服务流程、保密制度以确保为客户提供优质的产品及一流的服务。技术服务按步骤收费，您可以选择从以下任意一步开始提供服务或仅选择其中的单独一步，详细价格请垂询。

?酵母表达系统——步骤1. 目标基因亚克隆至酵母表达载体： 
扩增并抽提含有目标基因的载体质粒。
将目标基因亚克隆到合适的表达质粒上。
测序验证构建质粒的准确性。
可提供表达载体：pPICZα和pPIC9K 
提供客户：正确构建的重组表达质粒，含重组质粒的DH5α菌株及测序报告。 
服务周期：1周 
?酵母表达系统——步骤2. P. Pichia表达菌株电转化： 
酶切线性化表达质粒。
将表达质粒通过电转化到高效的P. Pichia表达菌株中。
利用蛋白酶去除不需要的纯化标签（Tag），再纯化获得所需的目标蛋白（可选，构建表达载体时需加入合适的蛋白酶切位点）。
通过PCR鉴定至少挑选5个阳性克隆。
可提供表达菌株：X33，GS115，KM71和SMD1168。 
提供客户：PCR阳性克隆及PCR结果报告。 
时间：1周 
? 酵母表达系统——步骤3. P. Pichia表达菌株筛选： 
将5个阳性克隆于BMGY培养基中扩增，然后换至BMMY培养基中，并加入甲醇诱导表达目标蛋白。
SDS-PAGE电泳检测培养上清中目标蛋白的表达情况，并挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。
如果培养上清中检测不到表达，则通过将上清浓缩20倍作用再检测，或通过Western-blot方法检测目标蛋白表达（客户需要提供相关抗体）。
提供客户：任意一个客户需要的阳性克隆菌株及表达筛选结果报告。 
时间：2周 
?酵母表达系统——步骤4. P. Pichia表达菌株表达优化：
挑选20个阳性克隆进行常规表达筛选，并对其中表达最好菌株优化表达条件。
对挑选出来的单克隆菌株，优化培养及诱导条件（培养基，菌体密度，甲醇浓度，诱导时间等），提高目标蛋白的表达量。 
提供客户：任意三个客户需要的阳性克隆菌株及优化表达条件结果报告。 
时间：2周 
?酵母表达系统——步骤5.目标蛋白表达及纯化：
摇瓶培养1L重组酵母菌，诱导表达目标蛋白。
通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
通过Western-blot验证目标蛋白正确性。 
提供客户：纯化好的目标蛋白1~10mg及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。 
时间：2~3周 
?酵母表达系统——步骤6.目标蛋白的再加工及详细检测 
对生物学活性要求较高的纯化后蛋白产品进行复性研究。
内毒素去除，除菌，冻干等进一步加工。
通过HPLC，质谱等方法详细检测目标蛋白的质量。 
服务内容： 
1.复性研究： 
利用多达18种不同复性缓冲液的体系，对目标蛋白进行小量复性试验提供复性后样品供客户检测。
可根据客户要求，按照其中一种样品的复性条件制备小量的复性蛋白。
可提供具体的复性缓冲液配方及复性工艺。
2.除内毒素
3.过滤除菌
4.冻干
5.HPLC检测
6.质谱检测
提供客户：加工后的终产品及相关实验和检测报告。 
时间：1~2周 
?酵母表达系统——步骤7. 大规模制备 
提供客户：合格的目标蛋白及服务报告。