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手工固相多肽合成所需试剂和耗材的内容如下


一、器材

反应管、多胎合成振荡器、多孔加热器、真空泵、洗瓶(六个)、微型试管

二、检测试剂

a.茚三酮、KCN、苯酚

b.乙醛、对四氯苯醌(C6O2Cl4

三、缩合

aHBTUNMM(N-甲基吗啡啉)

bHOBtDIC

四、洗、溶剂

DMFDCM、甲醇、乙醇

五、脱保护

哌啶(20%/DMF

六、裂解剂

TFAEDTTIS、苯甲硫醚

七、结第一个氨基酸残基

乙酸酐、吡啶、DMAP  

八、 树脂和保护氨基酸

   进口wang树脂和保护氨基酸


手工固相多肽合成操作步骤(的内容如下)

 

一.树脂溶涨
将树脂放入反应管中,加DMF(15ml/g)30min

二.脱保护
去掉DMF,加20%哌啶DMF溶液(15ml/g)5min,去掉再加20%哌啶DMF溶液(15ml/g)15min

三.检测
抽掉哌啶溶液,取十几粒树脂,用乙醇洗三次,加入茚三酮,KC N,苯酚溶液各一滴,105℃-110℃加热5min

四.洗
DMF(10ml/g)两次,甲醇(10ml/g)两次,DMF(10ml/g)两次

五.缩合

方法a:保护氨基酸三倍过量,HBTU三倍过量,均用尽量少DMF溶解,加入反应管,立刻假如NMM十倍过量.反应30min.

方法b:保护氨基酸三倍过量,HOBt三倍过量,均用尽量少DMF溶解,加入反应管,立刻假如DIC三倍过量.反应30min.

六.洗
DMF(10ml/g)一次,甲醇(10ml/g)两次,DMF(10ml/g)两次

. 重复二至六操作

八.最后一次洗涤
DMF(10ml/g)两次,甲醇(10ml/g)两次,DMF(10ml/g)两次, DCM(10ml/g)两次

九.裂解

配制裂解液(10ml/gTFA 94.5%;水2.5%EDT 2.5%TIS 1%

120min  (注:g是树脂的单位级)

十.吹干洗涤

将裂解液用氮气尽量吹干,用乙醚洗六次,然后常温挥干.